生產(chǎn)手性氨的新氧化還原酶
尼古拉斯·特納教授和他的同事,上個(gè)月在《Science》上發(fā)表了他們最新的研究結果,是一種醇脫氫酶(ADH)和氨脫氫酶的組合,用于將消旋醇轉化為手性氨。此反應在將醇轉換成酮的過(guò)程中生成一個(gè)NADH,而在后續的還原胺化反應中NADH重新變成NAD+。
這三個(gè)酶的純度和性狀對這個(gè)反應是非常重要的,而在提純后須將蛋白的His-Tag去除以獲得最優(yōu)活性與穩定性。此凈化過(guò)程也將去除NADH氧化酶的活性。所使用的兩個(gè)ADH酶分別是Aromatoleum aromaticum ADH和Lactobacillus brevis ADH, 前者氧化S型醇,后者氧化R型醇。而氨脫氫酶則是通過(guò)蛋白質(zhì)工程改造而獲得的源自芽孢桿菌的苯丙氨酸脫氫酶。
圖1 消旋體醇轉換為手性胺
圖2 代表性底物
因為通過(guò)化學(xué)法將醇轉化成手性胺的步驟復雜,并且需要金屬催化,且有時(shí)反應條件很苛刻,所以酶法反應過(guò)程可能更加有經(jīng)濟效益。通常ee%超過(guò)99%,而轉化率則有時(shí)候可以達到90%,還提出假設:轉化為胺的過(guò)程可進(jìn)一步推進(jìn)反應平衡往前進(jìn)方向反應。
文獻:N. J. Turner “Conversion of alcohols to enantiopure amines through dual-enzyme hydrogen-borrowing cascades” Science , 2015 , 349(6255), 1525-1529
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